共焦寿命角膜显微镜

角膜共聚焦显微镜是现代研究方法之一；它可以在细胞和微观结构层面上对角膜进行活体监测并实现组织可视化。

该方法由于显微镜的原始设计及其高分辨率，可以观察到活体角膜组织、测量其每一层的厚度并评估形态紊乱的程度。

角膜共聚焦显微镜的目的

描述各种炎症和营养不良性疾病中以及手术干预和接触 CL 后发生的角膜形态变化。

形态学检查数据对于评估病理过程的严重程度、治疗的有效性以及确定患者管理策略是必要的。

程序的適應症

• 角膜炎症性疾病（角膜炎）。
• 角膜营养不良性疾病（圆锥角膜、Fuchs营养不良等）。
• 干眼症。
• 角膜手术干预（穿透性角膜移植、角膜屈光手术）后的状况。
• 与佩戴隐形眼镜相关的状况。

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製備

此项检查无需使用麻醉剂即可进行。将一滴浸液滴在共聚焦显微镜的物镜上。这避免了物镜与角膜的直接接触，并最大限度地降低了损伤上皮的风险。

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技術 角膜共聚焦显微镜

这项研究使用一台放大倍数为500倍的ConfoScan 4 (Nider)共聚焦显微镜进行。该设备可以检查整个角膜厚度。

检查区域尺寸为440×330 μm，扫描层厚度为5 μm。将滴有凝胶的镜片置于角膜上直至接触，并安装到位，使浸液层厚度为2 mm。该设备的设计允许检查角膜中央区域及其近中央区域。

禁忌程序

相对禁忌症是由于急性炎症过程引起的严重眼刺激。

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正常的表現

角膜正常形态图

前上皮由5-6层细胞组成。整个上皮的平均厚度约为50微米。根据形态结构，上皮可分为以下几层（从内到外）：基底层、锥状细胞和表层。

• 最内层（基底层）由细小、致密的圆柱形细胞组成，无可见的细胞核。基底细胞边界清晰明亮。
• 中层由2-3层带刺（翅）的细胞组成，这些细胞有深凹陷，邻近细胞的突起嵌入其中。在显微镜下，细胞边界清晰可辨，细胞核可能不明显或不清晰。
• 上皮浅层由一层或两层多边形细胞组成，边界清晰，密度均匀。细胞核通常比细胞质亮，核周还可观察到暗环。

表层细胞中，深色细胞和浅色细胞明显可见。上皮细胞反射率的增加表明其代谢率下降，并开始脱落。

鲍曼膜是一种透明结构，不反射光，因此通常无法用共聚焦显微镜看到它。

基底下神经丛位于鲍曼膜下方。正常情况下，神经纤维呈现为深色背景上平行排列的明亮条纹，彼此接触。反射率（反射率）可能沿纤维方向不均匀。

角膜基质占角膜厚度的80%至90%，由细胞和细胞外成分组成。基质的主要细胞成分是角膜细胞，约占角膜体积的5%。

基质的典型显微镜图像包括几个明亮的不规则椭圆形小体（角膜细胞核），它们位于透明的深灰色或黑色基质层中。通常情况下，由于细胞外结构透明，无法观察到。基质可有条件地分为几个亚层：前层（位于鲍曼膜正下方，占基质厚度的10%）、前中层、中层和后层。

角膜细胞的平均密度在前基质层较高，向后层逐渐降低。前基质层细胞的密度几乎是后基质层细胞的两倍（如果前基质层细胞的密度为100%，则后基质层细胞的密度约为53.7%）。在前基质层中，角膜细胞的细胞核呈圆形豆形，而在后基质层中，细胞核呈椭圆形且更细长。

角膜细胞核的亮度可能有所不同。不同的反射光线的能力取决于其代谢状态。较亮的细胞被认为是活化的角膜细胞（“应激”细胞），其活动旨在维持角膜内部的稳态。在正常视野中，可以发现单个活化的细胞。

前角膜基质中的神经纤维呈现为明亮的均质带，通常形成分叉。

德斯梅膜通常是透明的，无法通过共聚焦显微镜看到。

后上皮是六边形或多边形扁平细胞的单层，其表面均匀发光，背景为清晰的深色细胞间边界。

该设备能够手动或自动计算细胞密度、面积和变异系数。

角膜结构的病理变化

圆锥角膜的特征是角膜前上皮和基质发生明显变化。

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