維生素A在血液中
最近審查：20.11.2021
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參考值（正常）的血清中維生素A（視黃醇）的級別：兒童1-6歲 - 0.7-1.5摩爾/升，7-12 - 0,91-1,71毫摩爾/升，13 -19歲 - 0.91-2.51μmol/ l; 在成人中它是1.05-2.09μmol/ l。
維生素A涉及脂溶性和以兩種形式存在 - 實際的維生素A或視黃醇（僅見於動物產品）和維生素原A，稱為胡蘿蔔素，它可以在壁中被轉換為視黃醇（從動物或植物來源中製備）消化道。大約50-90％的視黃醇與食物一起被吸收到小腸中，並在與乳糜微粒結合的複合物中運輸到肝臟，在那里以棕櫚酸視黃醇酯的形式儲存。如果有必要，它會以與維生素A結合蛋白結合的視黃醇的形式釋放到血流中。在血清中，維生素A結合蛋白+視黃醇複合物與轉甲狀腺素蛋白結合。從血清中，視黃醇被靶細胞捕獲，如視網膜光感受器和上皮細胞。
當維生素A進入身體超過要求（取決於年齡，性別和生理狀態每天180-430微克視黃醇）時，其過量沉積在形成該維生素貯庫的肝臟中。隨著食物中視黃醇的攝入量減少，其肝臟儲存物釋放到血液中，維持血清視黃醇濃度在正常水平（高於0.7μmol/ L）。其他生物活性形式的維生素A（視網膜和視黃酸）以非常低的濃度存在於血液中（低於0.35μmol/ L）; 對視黃醇的酯佔總維生素A的約5％（0.1-0.1μmol/ l）。
維生素A在氧化還原過程中起著重要的作用。視黃醇促進肝臟和肌肉中糖原的形成，促進血液中膽固醇的增加，參與類固醇和性激素的合成。它需要生長和形成視紫質的骨骨架再合成的，並且也有助於粘膜和皮膚罩的上皮的正常功能，防止其化生，角化過度和過度脫落。維生素A有助於加強頭髮，牙齒和牙齦。近年來，它示出了在預防癌症和免疫調節維生素A的變化的角色（吞噬作用的完成至關重要的，增加Ig的合成，刺激產生殺傷T細胞的，刺激T輔助II型等人）中。維生素A - 一種活性抗氧化劑，主要作用於維生素E的存在; 它可以防止維生素C氧化。維生素A缺乏被認為是惡性腫瘤的危險因素。在實驗研究中顯示，飲食中維生素A含量的增加將使中位壽命增加17.5％。鋅是維生素A代謝的必需輔助因子（維生素A結合蛋白合成所必需）。
成年人（20-50歲）的視黃醇平均每日需要量為1.2毫克（4000國際單位，1國際單位相當於0.3微克視黃醇），孕婦 - 1.5毫克（5000國際單位），母乳喂養 - 1， 8毫克（6000國際單位），60歲以上的人 - 2.5毫克（10,000國際單位）。視黃醇的日常需求中至少有三分之一應以現成形式遞送至身體; 其餘的可以通過使用類胡蘿蔔素吸收，其中視黃醇在體內形成。應該記住，食品中大約30％的視黃醇被熱處理破壞。視黃醇的活性比胡蘿蔔素高2倍，此外，後者只有30-40％被腸吸收。因此，在評估膳食攝入量時，認為1mg視黃醇大約相當於6mg類胡蘿蔔素。
根據Bessey在LA Anisimova的修改中測定血清中視黃醇（維生素A）和類胡蘿蔔素
該方法的原理
維生素A和類胡蘿蔔素的測定是基於它們在鹼性醇溶液中的水解，然後用有機溶劑的混合物萃取。
試劑
- 氫氧化鉀（KOH）的11M溶液。
- 96％乙醇。
- 1M氫氧化鉀（KOH）在96％乙醇中的溶液：1體積的11M KOH溶液與10體積的96％乙醇混合。該試劑在研究當天製備。如果在混合過程中發生著色，使用前必須通過蒸餾清潔酒精。
- Xylol，惠普。
- Oktan，h.ch.
- 二甲苯 - 辛烷混合物：通過混合等體積的二甲苯和辛烷製備。
調查是在分光光度計上進行的。
維生素A的測定過程
將從手指取出的血液（約1ml）加入離心機標籤中並置於溫水（溫度40-45℃）的玻璃杯中20-30分鐘。為了分離血清，用薄玻璃棒將血塊小心地纏繞在管的邊緣上並以3000rpm離心10分鐘。
選擇0.12ml血清並將其轉移至凝集管中，然後加入0.12ml 1M醇氫氧化鉀溶液。內容徹底動搖。
將帶有探針的試管置於60℃水浴中20分鐘以進行水解。
將樣品冷卻，向其中加入0.12ml二甲苯 - 辛烷混合物，劇烈振盪10-15秒。再次冷卻並離心。
用橡皮罐小心地用巴斯德移液管移除含有維生素A和類胡蘿蔔素的頂層，並將其轉移至微型軟管。
樣品在328nm波長處進行分光光度測定 - 以測定維生素A，並在460nm波長處測定類胡蘿蔔素。
分光光度法後所研究的樣品經受紫外線的維生素A.破壞輻射為了這個目的，在15-20厘米從石英微池設置（殺菌）燈，以使照射暴露的反應杯的部分，填充有液體的距離; 照射時間為45-60分鐘。
樣品在328nm的波長反複分光光度測定。維生素A的含量由消光值（光密度）的差異確定，並考慮由Bessey計算的維生素A係數（因子）637。
計算按以下公式進行：
X = 637×（Е328（1） - Е328（2）），
其中X是維生素A的含量，μg/ dL; 637是由Bessey計算的用於測定維生素A的係數; Е328（1） - 照射前溶液的光密度; E328（2）是照射後溶液的光密度。
以μg/ dL（μmol/ l）換算維生素A濃度的係數為0.035。
類胡蘿蔔素的含量按下式計算：
X = 480-Е480，
其中X是類胡蘿蔔素的含量，μg/ dL; 480是由Bessey計算的用於確定類胡蘿蔔素的係數; E480是測試溶液的光密度。
備註
根據Bessey的說法，在研究過程中可以採用更大或更小的血清體積，但其與乙醇溶液的體積的比率應該與二甲苯 - 辛烷混合物的體積（量）的任何變化一致。
血清中維生素A含量的標準是：新生兒和嬰兒 - 160-270微克/升; 在成人中，1.05-2.45μmol/ l（300-700μg/ l）。成人血清中類胡蘿蔔素的含量為800-2300μg/ l。