血液中的维生素 A

血清中维生素A（视黄醇）浓度的参考值（规范）：1-6岁儿童 - 0.7-1.5μmol/l，7-12岁 - 0.91-1.71μmol/l，13-19岁 - 0.91-2.51μmol/l；成人 - 1.05-2.09μmol/l。

维生素 A 是一种脂溶性维生素，以两种形式存在：维生素 A 本身或视黄醇（仅存在于动物产品中）和维生素 A 原，即胡萝卜素（从动物和植物产品中获取），它可以在消化道壁中转化为视黄醇。大约 50-90% 的膳食视黄醇在小肠中被吸收，并以乳糜微粒结合复合物的形式运输到肝脏，在那里以视黄醇棕榈酸酯的形式储存。在需要时，它会以视黄醇与维生素 A 结合蛋白复合的形式释放到血液中。在血清中，维生素 A 结合蛋白 + 视黄醇复合物与转甲状腺素蛋白结合。视黄醇从血清中被靶细胞吸收，例如视网膜和上皮的光感受器。

当人体摄入的维生素A超过其需求量时（根据年龄、性别和生理状态，每日视黄醇的摄入量为180-430微克），过量的维生素A会沉积在肝脏中，形成维生素A的储存库。当减少食物中视黄醇的摄入量时，肝脏中储存的视黄醇会被释放到血液中，从而维持血清中视黄醇的浓度在正常水平（高于0.7微摩尔/升）。其他具有生物活性的维生素A（视黄醛和视黄酸）在血液中的浓度非常低（低于0.35微摩尔/升）；视黄醇酯约占维生素A总量的5%（0.1-0.17微摩尔/升）。

维生素A在氧化还原过程中发挥着重要作用。视黄醇促进肝脏和肌肉中糖原的形成，有助于增加血液中的胆固醇含量，并参与类固醇和性激素的合成。它是骨骼系统生长和形成、视紫红质再合成所必需的，还能促进皮肤粘膜和外皮上皮的正常功能，防止其化生、角化过度和过度脱落。维生素A有助于强健头发、牙齿和牙龈。近年来，维生素A在预防癌症和调节免疫方面的多种作用已被证实（它是完成吞噬作用的必要条件，可促进免疫球蛋白的合成，刺激T细胞杀伤细胞的形成，刺激II型T细胞辅助细胞等）。维生素A是一种活性抗氧化剂，主要在维生素E存在下发挥作用；它保护维生素C免于氧化。维生素A缺乏被认为是恶性肿瘤的危险因素。实验研究表明，增加饮食中维生素A的含量可使平均预期寿命增加17.5%。锌是维生素A代谢中必需的辅助因子（维生素A结合蛋白的合成所必需的）。

成年人（20-50 岁）的视黄醇日平均需要量为 1.2 毫克（4000 IU，1 IU 相当于 0.3 微克视黄醇），孕妇为 1.5 毫克（5000 IU），哺乳期妇女为 1.8 毫克（6000 IU），60 岁以上的人为 2.5 毫克（10,000 IU）。 每日所需视黄醇至少有三分之一应以成品形式供给身体；其余部分可通过摄入类胡萝卜素来满足，人体内视黄醇就是由类胡萝卜素形成的。 需要注意的是，食品中约 30% 的视黄醇在热处理过程中会被破坏。视黄醇的活性是胡萝卜素的 2 倍，而且，后者只有 30-40% 被肠道吸收。因此，在评估饮食时，人们认为 1 毫克视黄醇约相当于 6 毫克类胡萝卜素。

根据 LA Anisimova 修改的 Bessey 方法测定血清中的视黄醇（维生素 A）和类胡萝卜素

方法原理

维生素 A 和类胡萝卜素的测定基于它们在碱性酒精溶液中的水解，然后用有机溶剂混合物萃取。

试剂

• 11 M 氢氧化钾 (KOH) 溶液。
• 96％乙醇。
• 1 M 氢氧化钾 (KOH) 溶液（96% 乙醇）：将 1 体积的 11 M KOH 溶液与 10 体积的 96% 乙醇混合。试剂在研究当天配制。如果混合过程中出现显色，则应在使用前通过蒸馏净化酒精。
• 二甲苯，化学纯
• 辛烷，化学纯
• 二甲苯-辛烷混合物：由等体积的二甲苯和辛烷混合而成。

该研究是使用分光光度计进行的。

维生素A的测定过程

取指血（约1毫升）放入离心管中，置于装有温水（40-45°C）的玻璃杯中，静置20-30分钟。为了分离血清，用细玻璃棒小心地沿管壁边缘划出血凝块，然后以3000转/分的转速离心10分钟。

收集0.12 ml血清，转移至凝集管中，加入0.12 ml 1 M氢氧化钾醇溶液，充分摇匀。

将装有样品的试管放入60℃水浴中20分钟进行水解。

冷却样品，加入0.12 ml二甲苯-辛烷混合液，剧烈振摇10-15秒，再次冷却后离心。

使用带有橡胶球的巴斯德吸管小心地取出含有维生素 A 和类胡萝卜素的上层，并将其转移到微量比色皿中。

样品经过分光光度计在 328 nm 波长下测定维生素 A，在 460 nm 波长下测定类胡萝卜素。

分光光度法测定后，将样品暴露在紫外线下以破坏维生素 A。为此，在距离微量比色皿 15-20 厘米处安装石英（杀菌）灯，使比色皿中装有液体的部分暴露在辐射下；照射时间为 45-60 分钟。

将样品在328nm波长下再次进行分光光度计测定。根据消光值（光密度）的差异，并考虑Bessey计算的维生素A系数（因子）637，计算出维生素A含量。

计算按照以下公式进行：

X = 637 × (E328(1) - E328(2)),

式中，X为维生素A的含量，μg/dl；637为Bessey计算的测定维生素A的系数；E328（1）为辐照前溶液的光密度；E328（2）为辐照后溶液的光密度。

将维生素 A 浓度从 µg/dL 转换为 µmol/L 的系数为 0.035。

类胡萝卜素的含量计算公式为：

X = 480-E480，

式中，X为类胡萝卜素含量，μg/dl；480为Bessey计算的测定类胡萝卜素的系数；E480为测试溶液的光密度。

笔记

根据贝西的说法，在进行研究时可以使用更大或更小的血清体积，但其与酒精溶液体积的比例必须保持恒定，而二甲苯-辛烷混合物的体积（数量）会发生变化。

血清中维生素A的正常含量：新生儿和婴儿：160-270 μg/l；成人：1.05-2.45 μmol/l（300-700 μg/l）。成人血清中类胡萝卜素的含量为800-2300 μg/l。