共聚焦显微镜

共聚焦显微镜目前被认为是最有前途的体内皮肤成像方法之一，这就是为什么临床医生和研究机构代表对它的兴趣异常高。

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共聚焦显微镜功能

在皮肤病学中，共聚焦激光显微镜用于：

• 研究化合物渗透到皮肤中（渗透途径、动力学、在皮肤中的分布）；
• 观察腺体的功能（确定主动和被动状态）；
• 微循环床研究（包括实时研究）；
• 肿瘤诊断。

在不讨论上述类型的共聚焦显微镜的优缺点的情况下，我们注意到近年来荧光激光共聚焦显微镜越来越受欢迎。

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用于皮肤检查的共聚焦显微镜

共聚焦显微镜提供了两个宝贵的机会：在细胞层面研究处于生理生命活动状态的组织，以及在四个维度（高度、宽度、深度和时间）上展示研究结果（即细胞活动）。对于图像质量和研究深度而言，组织的透光能力，即其透明度，起着至关重要的作用。共聚焦显微镜采用非接触式成像，光束不会对受检患者或实验动物造成任何伤害或不适。

共聚焦扫描激光显微镜 (CSLM) 用于检查皮肤。该方法能够以接近组织学的分辨率观察表皮和真皮乳头层。所有检查结果均显示在显示器上，并保存为图像文件包（例如动态缩微胶片或显微照片）。

该方法有两种类型：

• 反射（反射 CSLM）——基于各种细胞内和细胞间结构具有不同的光折射率这一事实，从而可以获得对比图像。
• 荧光（荧光 CSLM）- 使用穿透皮肤的激光并激发其中的外生或内生发色团，使其开始发射光子（即荧光）。

横向分辨率是指水平面（即平行于皮肤表面的平面）上各点之间的最小距离。轴向分辨率是指垂直于皮肤表面的平面上各点之间的最小距离。

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共聚焦显微镜的历史

130 年前，人们就开始积极研究制造一种能够在细胞层面显示活组织切片的显微镜。现代显微镜的主要元件设计于 19 世纪末，是一个带有螺旋排列微孔的旋转圆盘。这种圆盘是由德国学生保罗·尼普科夫 (Paul Nipkow) 于 1883 年发明的，并以他的名字命名 - 尼普科夫圆盘 (或尼普科夫盘)。这项发明基于光线穿过圆盘上的微孔和放大镜，能够深入组织并照亮距离表面一定距离的细胞碎片。当圆盘快速旋转时，这些细胞碎片会形成一幅图像。通过移动结构远离或靠近物体，可以改变所研究组织光学切片的深度。

直到 20 世纪 80 年代录像机的出现和 20 世纪 90 年代初能够处理图像的计算机的出现，才有可能制造并有效使用当今使用的现代显微镜。