在白鼠人造疤痕上移植异体角质细胞的实验工作

利用细胞潜能的愿望和寻找新的有效方法来改善疤痕美观的需求导致了尝试研究将角质形成细胞移植到疤痕表面的可能性的想法。

为了证明角质形成细胞培养技术改善疤痕外观的可能性，研究人员在实验室白色大鼠身上进行了一项实验研究，并为其创建了疤痕表面。该大鼠疤痕模型是通过在大鼠背部沿脊柱方向人工制造伤口而获得的。研究人员从大鼠身上切取大小相同的2x3厘米皮肤块。在“疤痕建模”手术后2.5个月，对大鼠进行皮肤磨削术（使用热烧灼去除疤痕上层），并从出生后2-4天的幼鼠皮肤中分离出同种异体角质形成细胞进行移植。

大鼠表皮细胞的分离和培养是在俄罗斯科学院细胞学研究所细胞技术实验室中采用如下技术进行的。

将皮肤用含有200单位/毫升庆大霉素的汉克氏盐溶液清洗，然后切成0.2-0.5平方厘米的小块^。将皮块在37°C下，在0.5%分散酶的平衡盐磷酸盐缓冲液中孵育1小时。然后将皮块转移到杜尔贝科氏磷酸盐缓冲液中，将表皮与真皮分离。将表皮在0.125%胰蛋白酶溶液中孵育10-15分钟，搅拌速度为50转/分，然后加入5%胎牛血清终止酶活性。所得细胞悬液的三分之一以纯细胞形式用于疤痕移植方案之一，另一三分之一在生物相容性的国产薄膜涂层“Polypor”上培养，第三三分之一在无基质的培养皿中培养。使用热灼伤在乙醚麻醉下进行大鼠的大鼠疤痕的皮肤化作用，随后将大鼠表皮细胞移植到它们上。

第一组大鼠在磨皮后，将无菌麻布片放置在已抛光、已用生理盐水清洗并擦干的疤痕表面，并在其上涂抹摇匀的同种异体大鼠表皮细胞悬液，浓度为每毫升150万个细胞（根据细胞学研究所的数据）。将麻布片放置在已抛光的疤痕上，使细胞平铺在疤痕表面。再在其上放置多层纱布绷带，并缝合至疤痕边缘。

将一部分获得的细胞悬浮液接种在培养皿中，放在切成培养皿形状的无菌多孔膜上，另一部分接种在没有膜的培养皿上。培养在 FAD 培养基中进行，该培养基由 DMEM 和 F12 培养基以 3:1 的比例混合而成，并添加 10% 胎牛血清、5 μg/ml 胰岛素（Sigma）、0.5 μg/ml 氢化可的松半琥珀酸酯（Sigma）。10 μg/ml 表皮生长因子 EGF（俄罗斯科学院细胞学研究所，圣彼得堡）。第二组和第三组大鼠，每组 7 只，在第一组大鼠手术后 6 天进行手术。此时，培养皿中接种的角质形成细胞悬浮液已形成多层，并将其移植到大鼠体内。第二组移植薄膜上的表皮细胞，第三组移植没有基质的多层表皮细胞。 7天后，将获得的多层同种异体角质形成细胞（MPALK）接种于“多孔”膜上，作为培养物直接移植到创面。为了防止薄膜撕破，用多层纱布绷带将薄膜固定，并缝合到大鼠皮肤上。

在将角质形成细胞移植到第三组无基质培养的大鼠之前，先用分散酶 (dispase) 处理 PAC，使其与培养皿底部分离。分散酶能够选择性破坏真皮-表皮之间的连接。当作用于多层细胞层时，分散酶会破坏基底层细胞与培养皿底部的连接，而对细胞间连接的影响则小得多，因此可以完全“去除”该层。使用分散酶分离多层细胞层的操作如下。将培养皿中的运输培养基倒掉，用含有抗生素（尤其是庆大霉素 (0.2 mg/ml)）的营养培养基洗涤细胞层三次。向多层细胞层中加入 0.125% 分散酶溶液（“Sigma”），并将其置于恒温箱中，在 t=37°C 下孵育 20-30 分钟。如果出现沿该层边缘剥落的白色边缘，则表明该层已开始从培养皿的边缘和底部分离。分离过程开始几分钟后，将分散酶溶液排干，用培养基清洗上皮层 2-3 次。将一片切成杯子大小的无菌伤口敷料“Lita-color”贴在表皮层表面，将用分散酶分离的层（用刮刀从杯底另外剥离）粘在上面。用眼镊将该层连同“Lita-color”餐巾纸（俄罗斯）的涂层一起从培养皿底部撕下，并小心地转移到准备好的疤痕表面。 “Lita-color”餐巾含有庆大霉素和外胶原蛋白（胶原蛋白提取物），当用生长培养基的残留物润湿，然后用生理溶液润湿时，会膨胀并成为现代伤口敷料，由于吸湿结构，可以很好地防止外部感染并快速愈合。

将多层纱布绷带覆盖在多孔膜和Lita-color餐巾上，并缝合在大鼠皮肤上，以加强固定。每只大鼠被单独饲养于笼中，以创造最佳条件，利于其维持和移植角质形成细胞的植入。移植了悬浮液和用分散酶分离的多层表皮细胞的大鼠的绷带每天用无菌生理盐水润湿数次，以创造最有利于细胞植入的条件。考虑到多孔膜不透水，第二组大鼠的绷带无需润湿，这是其优于未使用薄膜的移植的优势之一。10天后拆除绷带。细胞移植后疤痕的临床表现与未移植疤痕相比，除了颜色更粉红（由于磨皮）和剥落程度更大之外，几乎没有差异。这表明。伤口敷料随MPC掉落后立即，疤痕没有发生任何变化。

从老鼠身上提取活检材料。

将大鼠同种异体角质形成细胞移植至白鼠抛光瘢痕后，分别于1、2、5和9个月取材进行组织学、细胞形态学及电镜观察。另取未移植细胞的正常大鼠皮肤及瘢痕组织作为对照。大鼠麻醉采用乙醚麻醉。

麻醉后，用直径2 mm的活检穿刺器从角质形成细胞移植的标记区域取出瘢痕组织，置于2.5%戊二醛溶液中，制成电子显微镜检查材料。将用于组织学检查的组织片置于10%中性福尔马林溶液中，经酒精处理后，石蜡包埋，制成超薄切片，在光学显微镜下观察。

对照 I. 正常大鼠皮肤。

为了观察正常瘢痕改变大鼠皮肤与移植MPC后特定时间点瘢痕的显微图像之间的差异，本研究在各个阶段均展示了其照片和描述。

正常皮肤的表皮由7-9层细胞组成。角质层厚度适中，部分区域由6-8层角质鳞片构成。基底层由圆柱形细胞构成，细胞核大而轻，形状规则，并有多个核仁。细胞之间以及细胞与基底膜之间桥粒连接清晰可见。在边界清晰的基底膜下，表皮下层有细小的突起，与之平行的是纤细的胶原纤维束和弹性纤维束，其中包括细长的成纤维细胞和小血管。在深层，胶原纤维束和弹性纤维束呈不同方向排列。其中有许多管径相同的薄壁血管、细胞成分（成纤维细胞、肥大细胞、白细胞）。此外，还有大量的毛囊和皮脂腺。

对照组 2. 大鼠疤痕，2 个月大。

临床表现。疤痕呈淡粉色，有脱皮，部分区域有痂皮残留。由于胶原纤维收缩，疤痕面积缩小，约为3.0-3.5厘米^。皮肤附属物缺失。

显微镜图片。表皮由3-5层细胞组成，细胞呈褶皱状，基底细胞呈圆形，1排钻形，1-2排颗粒状，上层含透明角蛋白颗粒，细胞内可见水肿区域。角质层由薄到厚，变化不均匀。由于瘢痕组织收缩，可见瘢痕褶皱。褶皱延伸至乳头层，形成乳头状结构。表皮与真皮的边界为直线。基底膜并非完全可见。在表皮下层及深层，可见血管，管壁厚而松弛，许多血管稀疏，并伴有淤滞。血管周围有巨噬细胞和成纤维细胞聚集。巨噬细胞包围并吞噬从毛细血管释放的红细胞。在表皮下层及深层，存在细小的毛细血管。在表皮下，胶原蛋白纤维宽松地位于位置。在疤痕的较深层中，有胶原蛋白纤维的粗捆，其中有许多成纤维细胞。

大鼠角质形成细胞移植后一个月。

临床图片。疤痕是粉红色的，其面积有所减少，尤其是直径，平均为2.5-3 cm ^2。头发和皮脂腺不存在。

大鼠在薄膜上移植 MPaLK 和在无基质上移植 MPaLK 所获材料的显微镜检查数据几乎相同。然而，从技术角度来看，在无基质上移植 MPaLK 比在基质上生长 MPaLK 要复杂得多，也更费力。因此，在进一步研究角质形成细胞向疤痕移植时，我们使用了多层细麻布作为生长基础（“基质”）。

显微镜照片。表皮增厚至15-20层，几乎至表皮中部，角质形成细胞呈狭长、垂直排列，排列紧密。基底细胞排列不均匀。细胞核轻、大、圆形，有一或两个核仁，表明其具有较高的合成和增殖活性。表皮与真皮的边界为直线。棘层发达，由3-5层圆形细胞组成，其中有2个核仁细胞。

基底膜正下方有密集分布的细小胶原纤维束，与之平行的是大量废弃血管，深层胶原纤维较粗，聚集成致密的束状结构。大量大型成纤维细胞、肥大细胞（视野内可见2-3个）、巨噬细胞、白细胞和废弃血管，其管壁松弛，周围有疏松分布的胶原纤维。部分血管内可见淤滞，有形成分渗出。血管周围有成纤维细胞和单个淋巴细胞。无皮肤附属器。

将角质形成细胞悬浮液移植到抛光疤痕上时，显微镜下的图像与之前的图像有所不同。大多数动物的表皮较薄，由5-6层细胞组成。下层由不规则多边形细胞组成，细胞核呈圆形至不规则形状。表皮下层的状态与未移植MPALK的动物组相似。

在这种情况下，我们既可以讨论细胞移植过程中的延迟，也可以讨论以悬浮液形式移植的细胞的大量损失。因此，我们得出结论：通过以悬浮液形式移植角质形成细胞来修复疤痕是不合适的。

大鼠角质形成细胞移植后2个月。

临床图片。疤痕看起来薄又精致。在某些地方，观察到剥离和鳞状斑点。

显微镜照片。角质层增厚，局部角化过度。表皮增厚，由12-20排细胞组成。表皮和真皮之间的边界是一条直线。表皮下纤细的胶原纤维分布相当密集。在疤痕的深层，它们聚集成粗大的束状。在表皮下层，新生血管形成。在疤痕组织的下层，有许多废弃的血管与表皮表面平行。大型成纤维细胞均匀分布在疤痕厚度内，还有巨大的、多分支的巨噬细胞。

大鼠表皮细胞移植后5个月。

临床表现。疤痕均匀光滑，无脱皮，有单根毛发，疤痕边缘毛发密度较大，提示毛囊边缘向疤痕内生长，并有新毛囊形成。疤痕面积持续缩小。

显微镜照片。表皮仍然很厚（15-20层，有些地方多达30层），上层充满透明角蛋白颗粒。基底膜清晰可见。在其下，胶原纤维松散分布。在下层，胶原蛋白更强韧且紧密排列。胶原束之间有许多毛细血管。在上层，废弃血管数量减少。表皮和真皮的交界处略呈波状。在某些地方，疤痕组织中可见深层表皮增生。胶原纤维之间可见新生血管。出现单个毛囊和皮脂腺。

大鼠表皮MPA细胞移植后9个月大鼠疤痕。

临床表现。疤痕较早期明显缩小，平均面积约为1.5-2.0平方厘米^。疤痕表面，尤其是周围，覆盖着不均匀的细毛。残留轻微的细板状剥落。

微观图片。

表皮变薄，由6-8排细胞组成，结构类似于正常大鼠皮肤的表皮，但细胞密度高1毫米，且细胞较小。基底层由小的圆柱形细胞组成。基底膜清晰可见，半桥粒清晰可见。可见表皮下层有表皮增生。乳头层沿疤痕全长呈现。这些事实表明，此时移植的角质形成细胞与下层疤痕组织的粘附性已增强。因此，在MPC移植9个月后，对接受MPALK移植的患者进行疤痕护理可以采用传统方法。表皮下的胶原纤维比深层更细腻。出现了许多血管，尤其是表层血管。较大血管的管壁增厚。毛囊和皮脂腺数量众多。显微镜下图像类似于真皮样组织。

实验工作及其讨论的结果。

在本研究中，研究人员将各种形式的角质形成细胞移植到大鼠磨皮手术后人工制造的皮肤疤痕上——包括伤口覆盖物、悬浮在麻布上的角质形成细胞以及无基质的多层角质形成细胞。本研究旨在获取移植同种异体角质形成细胞对疤痕影响的形态学数据，并确定最佳移植方案。

结果表明，三种移植方法均可行，但无基质的MPAC移植过程非常耗费人力，且移植过程中MPAC可能受损，从而影响移植效果。此外，这种移植方法不适用于大面积移植。

角质形成细胞悬浮液移植是一种更具成本效益的方法，不需要长期细胞培养，而且我们建议使用无菌麻布坯料（其大小与疤痕大小相对应）的简单方法。与伤口涂层上的 MPC 相比，移植细胞悬浮液的治疗效果会延迟约一个月，但对于持续数月的治疗时间来说，这不是什么大问题。众所周知，当将 MPC 移植到烧伤患者体内时，皮肤结构的转变会逐渐发生，并持续数年。伤口涂层上的角质形成细胞培养移植是最方便和最有前途的方法，但成本也高得多。此外，目前需要寻找更先进的涂层选项，这些选项应具有柔韧性、吸湿性、抑菌或杀菌特性，并且对细胞呈生物中性。薄膜“Polypor”是家用薄膜伤口覆盖物的中间版本，尽管存在一些缺陷，但它使我们能够在实验中研究大鼠角质形成细胞在疤痕上的移植，并得出有关这种疤痕治疗方向的有效性的结论。

将MPC移植到烧伤创面的作者指出，在将多层角质形成细胞移植到消毒伤口后的第一周内，表皮增厚并分层。表皮的所有层都清晰可见。有趣的是，移植后的细胞层数比皮肤活检样本高出10-30%。作者注意到，MPC移植后第五天出现了角质透明颗粒，第三天就出现了基底膜和半桥粒。

J.Rives 等 (1994)、Paramonov BA (1996)、Kuznetsov NM 等 (1998) 发现烧伤后全层皮肤缺损患者移植 MPC 后早期，真皮与表皮之间的连接非常弱，呈直线状，乳头层缺失。到第 2 个月末，浅乳头和皮肤附属器开始形成，真皮与表皮之间的连接变得更强。文献资料表明，将同种异体角质形成细胞移植到烧伤患者创面是一种很有前途的方法。尽管同种异体角质形成细胞会发生排斥反应，但根据不同作者的说法，在 10 天到 3 个月内，它们仍然发挥着愈合创面、分泌生长因子和机械闭合缺损的作用。人们认为MPALC的抗原活性较低，因为在体外培养过程中，它们会失去朗格汉斯细胞，这使得它们能够在接受者的体内长期存在。此外，从年轻健康人皮肤获得的同种异体培养物比患者受伤后自体培养物具有更大的生物学潜力。

我们研究的主要目标是探究同种异体角质形成细胞是否会在疤痕上生根，以及在这种具有生物活性的“伤口涂层”的作用下，疤痕组织会发生哪些变化。如果结果积极，我们将致力于为康复医学领域开发最有效、最省力的技术。

我们获得的数据在许多方面与文献中关于同种异体角质形成细胞移植至烧伤创面后人表皮形态变化的数据相似。然而，在移植的形态学基底和技术方面也存在显著差异。因此，与将角质形成细胞移植至无瘢痕改变的创面相比，基底膜和真皮-表皮连接（半桥粒、乳头）的形成过程发生得较晚。显然，这是由于瘢痕组织的营养比真皮或肌肉筋膜差。瘢痕，尤其是陈旧瘢痕，是致密的结缔组织，血管数量极少，而烧伤创面底部是富含血管的肉芽组织。因此，角质形成细胞的移植和植入条件显然截然不同。细胞移植区域的血管化程度越高，其植入过程就越容易。由此推论，更适合用于年轻疤痕，因为年轻疤痕的结缔组织仍然比较疏松，且血管丰富。

由于这项实验工作，因此证明了：

1. 可以将 MPALK 移植到疤痕上。
2. 移植的最佳方法是在伤口覆盖的角质形成细胞的移植。
3. 疤痕表面应使用手术激光皮肤表面或舒曼切割机进行抛光。
4. 在mpalk的影响下，发生疤痕抛光表面的快速上皮化。
5. 血管组织越好，即疤痕越年轻，角质形成细胞移植的结果越好。
6. 在移植的角质形成细胞的影响下，疤痕组织逐渐转化并变成皮肤样（带皮肤附属物的更松散的疤痕组织）。
7. 疤痕组织从表皮下层开始逐渐松弛。其血管化得到改善，疤痕上下部的胶原纤维束排列比未进行细胞移植的疤痕组织更松散。毛囊和皮脂腺开始出现。表皮的结构已度过增生期，接近正常皮肤的表皮。
8. 观察到的变化与角质形成细胞分泌的生长因子和细胞因子有关，这些生长因子和细胞因子通过改善疤痕组织的营养，促进其从粗纤维组织向疏松组织转变，从而改善疤痕的外观。

因此，基于这项研究，可以得出结论，移植的角质形成细胞对疤痕组织具有有益的作用，这可能对各种类型疤痕患者的康复具有实际意义。

这项对大鼠的工作还使我们能够制定生长角质形成细胞的伤口覆盖物的要求。

伤口敷料应：

• 与细胞生物相容，
• 透气的，
• 具有弹性、成型的基底，
• 亲水性，
• 由于药物添加剂含有抗菌药物和对培养细胞无毒的抗氧化剂。

疤痕生物技术治疗的临床结果。

此前，N. Carver 等人（1993 年）发现，封闭敷料最有利于角质形成细胞与伤口的附着和存活，但不利于复层（成熟）表皮的形成。复层表皮的形成需要空气环境。因此，建议在多层表皮附着后 7-10 天去除封闭敷料，并在干敷料或水溶性药膏下处理伤口。可以说，细胞生长“基质”的质量和特性对于细胞材料移植的有效性至关重要，因此也影响着医生的治疗效果。尽管目前已有许多可供选择的敷料（人造皮肤、羧甲基纤维素无纺布、纤维蛋白涂层、半透性聚氨酯薄膜），但目前仍未找到理想的伤口敷料。此问题的重要一点是“底物”的成本（特殊的伤口覆盖率），因为它们的高成本增加了生物技术治疗的总体成本。

细胞技术的有效性迄今已得到证实，但遗憾的是，这些技术成本高昂，尤其是在尚未实现细胞成分工业化生产的国家。然而，美国等国家早已建立了烧伤移植用细胞材料的生产产业。尤其是BioSurface Technology Inc.公司，自1989年以来，已培养出37,000层多层角质形成细胞，用于治疗全球79个国家的240名患者（R. Odessey，1992），而1平方厘米细胞^培养的成本约为7-8美元。

治疗各种皮肤疾病和问题的技术都有许多差异，但是任何细胞处理都基于获得高质量的细胞材料及其移植。

该过程包括以下步骤：

• 从受害者（或捐赠者）身上取下皮肤，
• 将皮肤襟翼运送到生物技术中心，
• 基础层细胞的分离及其增殖，
• 多层角质形成细胞层（MLK）的生长。
• 细胞培养移植。

使用多层角质形成细胞片移植进行治疗的主要问题是在细胞移植的各个阶段都需要活细胞。用于分离自体或同种异体细胞的皮肤碎片应尽可能薄，因为这样更容易通过机械方法和酶促方法分离，并获得用于培养的活细胞悬浮液。可以通过用皮刀切割或使用眼睑、包皮和肩部内表面的皮肤来获取活细胞。由于这些细胞对卤素（氯、碘）和过氧化氢敏感，因此在材料采集过程中处理皮肤时不能使用它们。

皮肤移植细胞的产量和质量以及培养效率也取决于供体的健康状况和年龄。此外，皮肤活检样本必须尽快在适当的条件下（环境、温度）送至获得认证和认可的实验室。

皮瓣的保存和运输可选用添加10％牛血清的Eagle培养基或培养基199、添加5％胎牛血清和抗生素的DMEM培养基。

在细胞学实验室中，首先将皮肤活检分为小块，然后使用酶加工皮肤碎片：胰蛋白酶，胶原酶，配置酶等。

在酶的作用下，桥粒被破坏，角质形成细胞以单个细胞或由不同数量细胞组成的聚集体的形式释放到培养基中。仅使用基础角质形成细胞进行培养，这些细胞在含有5% CO的恒温箱、培养皿或烧瓶中（t = 37°C）的特殊培养基中生长。48小时后即可观察到角质形成细胞集落的形成，这些集落逐渐融合形成单层。获得足够数量的细胞后，将所得悬浮液接种到为此目的而准备的伤口敷料上，并置于培养皿中。首先，悬浮液形成单层角质形成细胞，然后形成多层角质形成细胞。角质形成细胞培养过程的各个阶段如图12（33、43、54、65）所示。

适合移植的多层角质形成细胞层的形成通常需要7-10天。有时，此时间会更长，具体取决于来源材料的质量（供体的年龄、健康状况、材料采集的准确性、所用培养基的质量等）。如果多层角质形成细胞层过度生长，其表面可能会出现不适合移植的凋亡细胞。在伤口覆盖物上培养多层角质形成细胞层（MLK）的培养皿，需置于温度至少为+15°C的特殊容器中送至诊所。

改进的格林方法用于增长 MPC

在我们的研究中，我们使用多层细麻布作为伤口覆盖物，放弃了在大鼠实验中使用的“Polypor”薄膜。因此，我们在预脱脂和无菌的细麻布上培养了多层角质形成细胞层，尽管这也不是最佳的伤口覆盖物。

遵守必要的道德标准对志愿者进行了临床研究：签署协议和知情同意。

1. 使用了患者自己（自体）和养生（同种异体）角质形成细胞的培养。
2. 患者自己的角质形成细胞是从上臂内部切割的一块皮肤中获得的。
3. 使用Thermocautery，Rotary Discs和Erbium Laser进行疤痕皮肤手术。
4. 吸收了正常营养，嗜性和肥大性疤痕的患者组。

应用细胞技术改善皮肤疤痕外观的技术过程包括以下阶段：

1. 病人选择。
2. 治疗本质的解释，获得预期结果，签署合同和知情同意的时间范围。
3. 在手术前2-3周向患者开处方1片1片，每天3次，每天3次锌片1片。
4. 在距离肩部的内表面，几乎在腋下区域的下部，距离距肩部的内表面2.0厘米2.0厘米，宽度为0.7-1.0 cm，以获得自体角质形成细胞。
5. 如果患者由于肩部内表面可能留下线性疤痕而拒绝分离自己的角质形成细胞，则从细胞库（同种异体角质形成细胞）中提取细胞材料。
6. 在经认证的此类工作的实验室中孤立并生长角质形成细胞。
7. 在获得足够数量的 MPC 移植到疤痕上后，诊所确定了手术日期，将材料放入培养皿中的特殊容器中。
8. 进行疤痕磨皮手术，止血后，用无菌生理盐水清洗磨皮面，擦干，然后将MPCs移植到无菌麻布上，使其“细胞朝下”。也就是说，MPCs上部的细胞位于下部，与磨皮面相邻。
9. 在其上敷上一层无菌薄膜，并用弹性绷带或弹性Omnifix创可贴将其固定在皮肤上。也可使用含硅酮的普通伤口敷料代替薄膜，例如美皮贴、美皮护、硅胶片。

5-7天后，薄膜或硅酮涂层被去除。到这个时候，所有角质形成细胞都应爬到抛光的疤痕上并附着在其表面上。

10. 薄膜和硅胶涂层下形成的湿润环境对此起到了积极作用。从此时起，疤痕上残留的薄层可以用库利奥辛或壳聚糖凝胶浸泡。这样，第二天就会形成一层致密的硬皮。为了方便患者，最好使用弹性透气的贴片（例如Omnifix）进行固定。透气的硬皮有助于已形成的表皮分化并发育成熟。

根据疤痕类型和磨削深度，绷带会在8-10天后脱落。此时，表皮的细胞层数比正常皮肤多30-40%。基底膜尚未形成。增厚的表皮角质形成细胞会分泌大量生物活性分子进入疤痕组织。

生物技术疤痕治疗的成功很大程度上取决于术后护理方法。细胞培养是一种“温和”的伤口覆盖物，在移植后的早期阶段，IPC 很容易从皮下组织剥离。因此，建议患者术后小心处理疤痕。术后 8-9 个月内，请勿揉搓，并用冷开水轻轻冲洗，以免撕掉新生的薄表皮，因为表皮与皮下组织结合不够紧密。

笔记。

手术前和磨皮过程中，可以使用卤化防腐剂和氧化剂（碘吡喃酮、磺碘吡喃酮、碘醇、碘酸盐、氯己定、过氧化氢），但在细胞移植前，由于其具有细胞毒性，严禁使用。亚甲蓝和亮绿对细胞也有毒性。

为了避免感染，尤其是在处理增生性疤痕时，可以使用硫酸新霉素、多粘菌素或庆大霉素治疗手术区域。这些药物对角质形成细胞无细胞毒性。

由于这种处理，实现了三重效应。

1. 平整疤痕表面。
2. 在其上方建立一层正常厚度的新表皮。
3. 由于移植细胞分泌的细胞因子、生长因子和其他生物活性分子的作用，并受到角质形成细胞、成纤维细胞和巨噬细胞的刺激，疤痕组织转化为真皮样组织。

疤痕变得不那么明显，弹性更高，毛孔和牛皮纸出现在其中，并且由于IPC中存在黑素细胞，色素沉着可以恢复。

然而，疤痕的这些积极方面并非立即显现。在这方面，有必要提醒患者，疤痕组织转化为真皮组织的过程缓慢，这种治疗的最佳效果最早也要 10-14 个月才能达到。敷料脱落后，抛光表面会立即呈现出明显的多色性，抛光深度越深，颜色越亮。使用铒激光抛光正常营养性疤痕时，对皮肤的损伤最小。疤痕和周围皮肤的颜色在 3 至 8 周内恢复。尽管采取了这些预防措施，术后有时仍会出现色素沉着，但可能会在几个月内自行消失。

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