聚合酶链反应（PCR）在传染病诊断中的应用

PCR 是一种 DNA 诊断方法，它利用 DNA 聚合酶，将细菌或病毒基因组 (DNA) 中被检测片段的拷贝数增加数百万倍。特定基因组特有的检测核酸片段被多次扩增（倍增），从而得以鉴定。首先，通过加热将细菌或病毒的 DNA 分子分成两条链，然后在合成的 DNA 引物（核苷酸序列特定于待测基因组）的作用下，它们与 DNA 的互补片段结合，并在耐热 DNA 聚合酶的作用下，在每个引物之后合成第二条核酸链。最终获得两条 DNA 分子。该过程重复多次。一个 DNA 分子，即一个细菌或病毒颗粒，就足以进行诊断。在反应中引入一个额外的步骤——使用逆转录酶在 RNA 分子上进行 DNA 合成——使得检测 RNA 病毒（例如丙型肝炎病毒）成为可能。 PCR是一个循环重复的三阶段过程：变性、引物退火、DNA合成（聚合）。通过ELISA或电泳鉴定DNA的合成量。

PCR可以使用各种生物材料——血清或血浆、尿道刮片、活组织检查、胸腔积液、脑脊液等。PCR主要用于诊断传染病，如病毒性乙型肝炎、病毒性丙型肝炎、病毒性丁型肝炎、CMV感染、性传播感染（淋病、衣原体、支原体、解脲支原体感染）、结核病、HIV感染等。

PCR在诊断传染病方面相对于其他研究方法的优势如下：

• 可以在身体的任何生物环境中检测到传染源，包括活检过程中获得的材料；
• 可以在疾病的早期阶段诊断传染病；
• 可以定量评估研究结果（所研究材料中含有多少病毒或细菌）；
• 方法灵敏度高，例如PCR检测血液中乙肝病毒DNA的灵敏度为0.001pg/ml(约4×102^拷贝/ml)，而采用分支探针的DNA杂交方法的灵敏度为2.1pg/ml(约7×105^拷贝/ml)。

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