血母细胞瘤的免疫分型

近年来，血液学研究的重大进展与现代免疫学方法以及流式细胞仪等自动化外周血和骨髓细胞分析分选手段的使用密切相关。在许多情况下，尤其是在淋巴增生性疾病中，对疾病基质细胞（血液、红骨髓、淋巴结、脾脏等）进行传统的形态学和细胞化学研究，无法让我们在形态相似的细胞中识别出各种变异，也无法确定病理克隆的来源。这些问题只有通过研究细胞的免疫学特性才能解决。造血细胞分化的每个阶段都对应着一组自身的抗原，根据国际分类，这些抗原被称为分化，并被划分为分化簇，称为CD。

在肿瘤性病变中，分化阻滞可能发生在正常细胞发育的任何阶段，从而形成决定疾病基础并具有相同免疫学（或表型）特征的病理细胞克隆。通过研究细胞上的这些标记物，可以确定它们对应的疾病类型和变体，即根据细胞的免疫学表型进行鉴别诊断。这在淋巴增生性疾病中最为困难，因为该疾病病理基础的主要细胞在形态上几乎是相同的。

表型分析允许使用单克隆抗体，根据细胞壁中分化抗原（受体）的存在，对髓系、单核细胞系和淋巴细胞系的原始细胞和成熟细胞进行分型。“评估身体免疫状态”部分描述了细胞标志物研究的特征和诊断价值；下文简要介绍了与血母细胞增多症诊断相关的细胞抗原标志物。以下抗原（标志物）可在血细胞和红骨髓的膜上检测到。

• CD2是一种单体跨膜糖蛋白。它存在于血液循环中所有T淋巴细胞以及部分NK淋巴细胞的表面。CD2参与T淋巴细胞的替代激活过程。临床实践中，使用单克隆抗体检测CD2可用于对急性T细胞白血病、淋巴瘤、慢性炎症和免疫缺陷疾病进行表型分析。
• CD3是一种与抗原特异性T细胞受体结合的蛋白质复合物，是T淋巴细胞的主要功能性标记。它促进活化信号从细胞膜转移到细胞质。CD3检测可用于诊断急性T细胞白血病、淋巴瘤（非T细胞淋巴肿瘤不表达CD3）和免疫缺陷疾病。
• CD4 是一种跨膜糖蛋白，由 T 辅助细胞（诱导细胞）亚群表达，占外周血淋巴细胞的 45%。在胸腺淋巴细胞发育的早期阶段，所有皮质淋巴细胞均表达 CD4 抗原和 CD8。髓质胸腺细胞的表型与外周血中成熟的 CD4+ T 细胞（T 辅助细胞）相似，已表达 CD4 或 CD8 受体。在外周血中，高达 5% 的细胞同时携带 CD4 和 CD8 标记。部分单核细胞系细胞可能少量表达 CD4。CD4 在大多数 T 细胞淋巴瘤（包括蕈样肉芽肿）以及人类嗜T细胞病毒 (HTLV) 相关 T 细胞白血病 (HTLV) 中均有表达。
• CD5是一种单链糖蛋白，存在于所有成熟T淋巴细胞和大多数胸腺细胞中，在B淋巴细胞中表达较弱。CD5在B细胞慢性淋巴细胞白血病和中心细胞淋巴瘤的肿瘤细胞中可检测到。在其他类型的恶性淋巴系统疾病（例如滤泡性淋巴瘤、毛细胞白血病和大细胞淋巴瘤）中，CD5不表达。
• CD7是一种单链蛋白，是T细胞分化的最早标志物。它在前T淋巴细胞迁移到胸腺之前就已表达。CD7在大多数NK细胞中均可检测到，在单核细胞中表达较弱。B淋巴细胞和粒细胞不含有该抗原。CD7检测用于诊断淋巴瘤和儿童T细胞淋巴细胞白血病。
• CD8 是一种由两条多肽链通过二硫键连接的蛋白质。它由细胞毒性T淋巴细胞和抑制性T淋巴细胞亚群表达，这些亚群占外周血淋巴细胞的20-35%。该抗原也由自然杀伤（NK）淋巴细胞、皮质胸腺细胞、30%的髓质胸腺细胞以及骨髓红细胞亚群表达。CD8 检测可用于定量测定抑制性T细胞的含量（参见上文“血液中的抑制性T淋巴细胞”部分）。

• CD10 是一种细胞膜相关的内肽酶。CD10 在幼年 B 淋巴细胞和皮质淋巴细胞亚群中表达。所有 ALL 细胞均有表达。
• CD11c 在巨噬细胞、单核细胞、粒细胞、NK 细胞和毛细胞白血病细胞的细胞膜上表达。
• CD13是一种糖蛋白，由髓单核细胞系（祖细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞和髓系白血病细胞）表达。T细胞、B淋巴细胞、红细胞和血小板中不存在CD13。
• CD14是一种表面膜糖蛋白。它主要由单核细胞和巨噬细胞表达。在外周血和骨髓中，超过95%的单核细胞可检测到CD14。在急性髓细胞白血病中观察到CD14的高表达。该抗原在急性和慢性淋巴细胞白血病中不表达。
• CD15是一种寡糖，参与吞噬作用和趋化作用。该抗原存在于成熟粒细胞和别列佐夫斯基-施滕伯格细胞的表面。在霍奇金病中可检测到CD15抗原的表达。在非霍奇金淋巴瘤中，大多数病例检测不到CD15。
• CD16 表达于粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和 NK 细胞表面。所有表达该抗原的淋巴细胞均具有抗体依赖性细胞毒作用。在慢性粒细胞白血病分型过程中，会检测 CD16 以鉴定 NK 细胞。
• CD19是一种糖蛋白，存在于所有外周B淋巴细胞和所有B细胞前体细胞中。它在浆细胞中不存在。它是B细胞的最早标志物，在调节B细胞活化和增殖中起着重要作用。CD19在所有B细胞来源的急性白血病肿瘤细胞中均有表达，也存在于某些类型的急性单核细胞白血病中。
• CD20是一种非糖基化蛋白。在B淋巴细胞的个体发育过程中，CD20抗原在淋巴细胞前B细胞分化阶段CD19之后出现。它不存在于浆细胞的质膜上。它在ALL、B细胞慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病、伯基特淋巴瘤以及罕见的急性单核细胞白血病中表达。
• CD21是一种糖蛋白，大量存在于淋巴器官的B淋巴细胞中，少量存在于外周血的B细胞中。CD21是爱泼斯坦-巴尔病毒的受体。
• CD22 是一种由两条多肽链组成的蛋白质。它表达于大多数 B 淋巴细胞的膜上，包括前体细胞（幼淋巴细胞）。该抗原在 B 淋巴细胞（浆细胞）活化后不表达。CD22 在毛细胞白血病中表达最显著，在髓系白血病和非 T 细胞急性淋巴细胞白血病中表达较弱。
• CD23是一种糖蛋白，在活化的外周血B淋巴细胞中表达量较高。CD23介导IgE依赖性的细胞毒性以及巨噬细胞和嗜酸性粒细胞的吞噬作用。
• CD25是一种单链糖蛋白，被鉴定为IL-2的低亲和力受体。该受体在活化的T淋巴细胞上表达，在活化的B细胞上表达（但密度较低）。在健康个体的外周血中，该抗原存在于超过5%的淋巴细胞上。
• CD29 是一种纤连蛋白受体。它广泛分布于组织中，并由白细胞表达。外周血细胞中的 CD29 检测可用于对具有 CD4+CD29+ 表型的 T 细胞亚群进行分型，这些亚群被称为 2 型辅助细胞 (Th2)。这些细胞通过产生淋巴因子参与体液免疫应答。
• CD33 是一种跨膜糖蛋白。它存在于髓系和单核细胞系细胞的表面。在外周血中，它存在于单核细胞表面，在粒细胞表面的含量较少。约 30% 的骨髓红细胞表达 CD33，包括原始粒细胞、早幼粒细胞和中幼粒细胞。多能干细胞的细胞膜上不表达该抗原。CD33 检测用于鉴定髓系白血病细胞。淋巴系和红系白血病细胞不表达 CD33。
• CD34 是一种磷酸糖蛋白，由造血祖细胞（包括单能干细胞）表达。CD34 抗原在早期祖细胞中表达最为明显；随着细胞成熟，其表达逐渐下降。CD34 也存在于内皮细胞中。CD34 检测可用于鉴定急性髓细胞白血病和淋巴细胞白血病中的细胞。在慢性淋巴细胞白血病和淋巴瘤中，CD34 抗原表达未检测到。

• CD41a 在血小板和巨核细胞中表达。检测 CD41a 的单克隆抗体可用于诊断巨核细胞白血病。在格兰兹曼血小板无力症中，该抗原的表达缺失或受到显著抑制。
• CD42b是一种由两条多肽链组成的膜糖蛋白。该标记物在血小板和巨核细胞表面检测。在临床实践中，检测CD42b用于诊断血小板病——Bernard-Soulier综合征。
• CD45RA属于跨膜糖蛋白，是一种常见的白细胞抗原。它表达于B淋巴细胞的细胞膜上，T淋巴细胞的表达较少，成熟髓样胸腺细胞也表达该抗原。粒细胞不表达该标记物。
• CD45RO是CD45RA的低分子量亚型，CD45RA是一种常见的白细胞抗原。它在T细胞（记忆T淋巴细胞）、B淋巴细胞亚群、单核细胞和巨噬细胞中检测到。CD45RO单克隆抗体与大多数胸腺细胞（静息CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群）以及成熟的活化T细胞相互作用。髓单核细胞、粒细胞和单核细胞也携带该抗原。它在中心母细胞淋巴瘤和免疫母细胞淋巴瘤中检测到。
• CD46是一种O-糖基化二聚体。它广泛分布于组织中，在T细胞、B淋巴细胞、单核细胞、粒细胞、NK细胞、血小板、内皮细胞、成纤维细胞中均有表达，但不存在于红细胞表面。CD46为组织提供保护，使其免受补体侵害。
• CD61是一种血小板抗原。它表达于外周血和红骨髓的血小板，以及巨核细胞和巨核母细胞。其测定可作为急性巨核母细胞白血病的标志物。在格兰兹曼血小板无力症患者中，抗原表达缺失或受到抑制。
• CD95，也称为Fas或APO-1，是一种跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子受体家族。它在外周血T淋巴细胞（CD4+和CD8+）上大量表达，在B淋巴细胞和NK细胞上表达较少。该抗原也在粒细胞、单核细胞、组织细胞和肿瘤细胞上表达。CD95与Fas配体（CD95L）结合可诱导细胞凋亡。
• CD95L，即Fas配体，是一种属于肿瘤坏死因子受体家族的膜蛋白。该抗原由细胞毒性T淋巴细胞、NK细胞以及肿瘤细胞表达；它是细胞凋亡的主要诱导因子。
• HLA-DR是人类主要组织相容性复合体（HLA）II类分子的单态决定簇。该标记物表达于朗格汉斯细胞、淋巴器官的树突状细胞、某些类型的巨噬细胞、B淋巴细胞、活化T细胞和胸腺上皮细胞。该标记物的研究可用于定量测定具有CD3+ HLA-DR+表型的活化T淋巴细胞。

使用针对标记物的不同单克隆抗体选择，可以创建特定形式的白血病特征细胞的表型肖像。

免疫表型分析方法除了用于血母细胞增多症的诊断和鉴别诊断外，其在治疗过程中用于评估缓解状态和残留白血病细胞群也已被证明尤为重要。通过了解诊断期间母细胞的表型“特征”，这些标记物能够在缓解期检测出白血病克隆细胞，并通过其数量的增加，在临床和形态学症状出现之前（1-4个月）预测复发的发生。

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